Kateşin yüklü nanopartiküllerin antioksidan etkinliğinin incelenmesi

Abstract

Sunulan tez çalışmasında, antikanser ve antioksidan aktivitesi daha önceki çalışmalarda gösterilmiş olan Kateşin molekülünün poli (laktik-ko-glikolik asit) (PLGA) nanopartikül taşıyıcı sistemlere yüklenmesi ile Kateşin yüklü PLGA nanaopartiküllerinin sentezlenmesi, karekterizasyonu ve biyolojik etkinliğinin araştırılması amaçlanmıştır. Tez çalışmasının ilk aşamasında poli-laktik asit/poli-glikolik asit (PLA/PGA) (50:50) bileşimlerine sahip PLGA kopolimeri ile Kateşin yüklü nanopartiküller, tekli emülsiyon-çözücü-buharlaştırma yöntemi ile hazırlanmıştır. Nanopartiküllerin karakterizasyon çalışmaları sonucu Kateşin yüklü nanopartikül büyüklüklerinin sırasıyla yaklaşık 188.6 ve 292.6 nm olduğu saptanmıştır. Üretilen nanopartiküllerin Kateşin enkapsülasyon verimlerinin, 20mg (K1NP) ve 40 mg (K2NP) etken madde kullanılarak sentezlenen nanopartiküller için %10 olduğu üst fazdan indirekt tayin yöntemi ile UV spektrofotometre ölçümlerinden yararlanarak hesaplanmıştır. Farklı pH ortamlarında PLGA nanopartiküllerden etken madde salım çalışması 45 gün sürdürülmüş ve nanopartiküllere yüklenen Kateşinin pH 6 ortamında en yüksek salım miktarı ile % 88’nin salındığı saptanmıştır. SEM (Taramalı Elektron Mikroskobu), AFM (Atomik Güç Mikroskobu) ve FTIR (Fourier Dönüşümlü Kızılötesi Spektroskopisi) analizleri ile PLGA nanopartiküllerin başarıyla yüklendiği gözlenmiştir. Tezin son aşamasında, karşılaştırmalı olarak Kateşinin enkapsüle ve serbest formlarının biyolojik etkinliği araştırılmıştır. Kateşin içeren PLGA nanopartikül sisteminin antioksidan etkinliği 2.2-Diphenyl-l-picrylhydrazyl (DPPH) yöntemi ile incelenmiştir. Antikanser etkinliği ise MCF7 meme kanser soyu ve C6 Glioma beyin kansersoyları üzerinde MTT (3-[4,5-dimetiltiazol- 2-il]-2,5-difeniltetrazolyum bromür) yöntemi kullanılarak gösterilmiştir. Nanopartiküler sisteme yüklenen Kateşin maddesinin serbest formuna göre tüm pH ortamlarında ortalama 45 gün süre ile antioksidan etkinlik gösterdiği görülürken serbest formunun ortalama 15.gün sonunda antioksidan etkinliğini yitirdiği görülmüştür. MCF7 ve C6 Glioma hücre soyları üzerine yapılan antikanser etkinlik analizi sonucunda enkapsüle Kateşin maddesinin MCF7 hücre soyu üzerine 72 saat süreyle antikanser aktivite gösterdiği görülürken, C6 Glioma hücre soyları üzerine antikanser etkisini 48 saate varan süreyle azalarak gösterdiği görülmektedir. Sonuçlar, PLGA polimerik nanopartiküler sistemin Kateşinin maddesinin kontrollü ve uzun dönemde salımını sağladığını göstermektedir. Ayrıca, hazırlanan sistem Kateşin maddesini biyodegredasyondan ve ortam şartlarından koruyucu özellik göstererek biyouyumluluğunu ve biyararlanımını arttırdığı tespit edilmiştir.